1、 夾心法按操作步驟可分為一步法、兩步法和三步法。三種方法之間的差異總結如下：
 
2、 ELISA競爭法與夾心法的區別：
競爭性ELISA：
由于缺少兩個以上可用于夾心法的位點，小分子抗原或半抗體不能用雙抗體夾心法測量，可以使用競爭法。原理是樣品中的抗原與一定量的酶標記抗原競爭，并與固體抗體結合。樣品中抗原含量越多，與固相結合的酶標記抗原越少，顏色越淺。
優點：適用于小分子抗原，數據重現性高。
缺點：總體敏感性和特異性較差。
夾心ELISA：
檢測到的抗原被包裹在兩種抗體之間，其中一種抗體將抗原固定在固相載體上，即捕獲抗體。另一種是檢測抗體，酶標記后可直接用于測定抗原的量；或者在沒有標記的情況下，通過酶標記的兩種抗體來測量抗原的量。必須仔細選擇這兩種抗體，以避免交叉反應或競爭同一抗原結合位點。
優點：高度敏感和特異性，抗原不需要預先純化。
缺點：抗原必須具有兩個以上的抗體結合位點。
競爭法和夾心法有相同點：兩種方法都用于檢測抗原物質。
差異：競爭法用于檢測小分子抗原物質。只有一個反應位點，不能用夾心法檢測。大分子抗原更適合夾心法（也可以使用競爭法），因為夾心法具有更好的特異性和敏感性。
 
注：不同物質的適用原則可能不同，因此并不是說競爭法的結果必然優于三明治法，三明治法的結果也不一定優于競爭法。我會根據不同的項目推薦不同的方法。
 
3： 即用標準（稀釋液體標準）和高濃度單試劑標準（粉末標準）的優缺點
隨時可用：
優點：使用更方便。無需額外稀釋，即可拆卸立即使用。線性度會更好
缺點：儲存時間相對較短，穩定性容易受到儲存條件和時間的影響
粉末標準：
優點：儲存時間更長，試劑穩定性更好，可根據需要配置所需的標準濃度
缺點：你需要自己稀釋線性濃度。操作麻煩，稀釋線性容易出現問題